信使 RNA (mRNA) 已成为一种有前途的治疗分子，在治疗中枢神经系统疾病、肿瘤、COVID-19 和其他疾病方面具有广泛的临床应用。 mRNA 疗法必须封装到安全、稳定和有效的递送载体中，以防止货物降解并防止免疫原性。外泌体因其良好的生物相容性、低免疫原性、小尺寸、独特的穿越生理屏障的能力和细胞特异性向性而在 mRNA 递送中受到越来越多的关注。此外，这些外泌体可以被设计为利用天然载体来靶向特定的细胞或组织。这种有针对性的方法将增强 mRNA 的功效并减少副作用。然而，必须解决诸如缺乏一致可靠的外泌体纯化方法以及将大mRNA有效封装到外泌体中等困难。本文概述了细胞源性囊泡介导的 mRNA 递送及其生物医学应用的当前突破。© 2024。作者。

胰腺癌，主要是胰腺导管腺癌（PDAC），仍然是一种高度致命的恶性肿瘤，治疗选择有限，预后不佳。通过针对导致 PDAC 发生和进展的潜在分子异常，基因治疗提供了一种有前景的策略来克服传统放疗和化疗带来的挑战。本研究旨在探索特异性靶向 PDAC 中 CCAAT/增强子结合蛋白 α (CEBPA) 基因的小激活 RNA (saRNA) 的治疗潜力。为了克服与 saRNA 递送相关的挑战，四面体框架核酸 (tFNA) 被合理设计为纳米载体。这些 tFNA 通过截短的转铁蛋白受体适体 (tTR14) 进一步功能化，以增强 PDAC 细胞的靶向特异性。构建的基于 tFNA 的 saRNA 制剂表现出卓越的稳定性、高效的 saRNA 释放能力、大量的细胞摄取、生物相容性和无毒性。体外实验表明，利用 tTR14 修饰的 tFNA 纳米载体成功进行了 CEBPA-saRNA 的细胞内递送，导致肿瘤抑制基因（即 CEBPA 及其下游效应子 P21）显着激活，从而显着抑制 PDAC 细胞增殖。此外，在 PDAC 小鼠模型中，tTR14 修饰的 tFNA 介导的 CEBPA-saRNA 递送有效上调了 CEBPA 和 P21 基因的表达，从而抑制了肿瘤生长。这些令人信服的发现强调了通过设计的 tFNA 纳米载体传递 saRNA 来诱导肿瘤抑制基因激活的潜在效用，作为 PDAC 的创新治疗方法。© 2024。作者。

肠道免疫失调与肿瘤的发生和形成密切相关。环指蛋白 128 (RNF128) 已被鉴定在先天和适应性系统中发挥独特的免疫调节功能。然而，RNF128在结肠炎和结直肠癌（CRC）等肠道炎症性疾病中的生理作用仍存在争议。阐明RNF128在结肠炎和CRC中的功能和机制。右旋糖酐硫酸钠（DSS）诱导的结肠炎和氧化偶氮甲烷的动物模型(AOM)/DSS 诱导的 CRC 在 WT 和 Rnf128 缺陷小鼠中建立，并通过组织病理学进行评估。采用免疫共沉淀和泛素化分析来研究 RNF128 在 IL-6-STAT3 信号传导中的作用。与配对的瘤周组织相比，RNF128 在临床 CRC 组织中显着下调。 Rnf128缺陷小鼠对DSS诱导的结肠炎和AOM/DSS或APC突变诱导的CRC高度敏感。在 IL-6 刺激下，RNF128 的缺失促进了体内和体外癌发生早期转化阶段的 CRC 细胞增殖和 STAT3 激活。从机制上讲，RNF128与IL-6受体α亚基（IL-6Rα）和膜糖蛋白gp130相互作用，并以连接酶活性依赖性方式介导它们的溶酶体降解。通过IL-6受体的一系列点突变，我们发现RNF128促进IL-6Rα的K398/K401处和gp130的K718/K816/K866处的K48连接的多泛素化。此外，阻断 STAT3 激活可有效消除 Rnf128 缺陷小鼠在癌变转化阶段的炎症损伤。RNF128 通过抑制 IL-6-STAT3 信号传导来减轻结肠炎和结直肠肿瘤发生，这为 IL-6 受体和结直肠癌的调节提供了新的见解。炎症到癌症的转变。版权所有 © 2024。由 Elsevier B.V. 制作和托管

T 细胞在抗肿瘤反应中发挥核心作用。然而，它们经常在肿瘤微环境中面临许多障碍，包括缺乏可用的必需代谢物，如葡萄糖和氨基酸。此外，癌细胞可以通过上调代谢物转运蛋白并维持高代谢率来垄断这些资源，从而繁荣和增殖，从而在竞争中胜过T细胞。在此，我们试图通过增强T细胞的糖酵解能力来更好地改善肿瘤附近的T细胞抗肿瘤功能。与肿瘤细胞竞争。为了实现这一目标，我们对人类 T 细胞进行了改造，使其表达一种关键的糖酵解酶——磷酸果糖激酶，并结合葡萄糖转运蛋白 3（一种葡萄糖转运蛋白）。我们将它们与肿瘤特异性嵌合抗原或 T 细胞受体一起共表达。与对照细胞相比，工程细胞表现出细胞因子分泌增加和 T 细胞激活标记物上调。此外，它们表现出卓越的糖酵解能力，这在人类肿瘤异种移植模型中转化为改善的体内治疗潜力。总之，这些发现支持实施 T 细胞代谢工程以增强癌症细胞免疫疗法的功效。©作者（或其雇主）2024。根据 CC BY-NC 允许重复使用。不得商业再利用。请参阅权利和权限。英国医学杂志出版。

我们的目的是根据 BRCA1/2 突变状态和差异 PD-1 表达水平来研究上皮性卵巢癌 (EOC) 肿瘤免疫微环境的独特免疫学特征。从新诊断的晚期患者中收集肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL) -阶段 EOC（YUHS 队列，n=117）。该 YUHS 队列与卵巢浆液性囊腺癌 (n=482) 的癌症基因组图谱 (TCGA) 数据进行了比较，比较了生存结果和根据 BRCA1/2 状态的免疫相关基因谱。我们使用多色流式细胞术来表征有或没有 BRCA1/2 突变的 TIL 的免疫表型和异质性。我们进行了体外功能测定，以评估 CD8 TIL 对抗 PD-1 治疗的重振能力。我们发现，具有 BRCA1/2 突变 (BRCA1/2mt) 的 EOC 患者表现出更好的生存结果和显着更高的肿瘤突变负荷 (TMB) ，与 BRCA1/2 非突变 (BRCA1/2wt) 患者相比。此外，BRCA1/2mt 肿瘤内的 CD8 TIL 表现出的特征表明，比 BRCA1/2wt 肿瘤中的 T 细胞耗竭更严重。值得注意的是，与 BRCA1/2mt 肿瘤相比，BRCA1/2wt 肿瘤中抗 PD-1 介导的 CD8 TIL 重振能力显着更强。此外，在 BRCA1/2wt 组中，PD-1highCD8 TIL 的频率与抗 PD-1 治疗后 CD8 TIL 的恢复能力呈正相关。我们的结果强调了 EOC 中 CD8 TIL 的独特免疫特征以及对 EOC 的差异反应。抗 PD-1 治疗，取决于 BRCA1/2 突变状态。这些发现表明，对于选定的 BRCA1/2wt EOC 患者，免疫检查点阻断可能是一种有前景的一线治疗选择。© 作者（或其雇主）2024。CC BY-NC 允许重复使用。不得商业再利用。请参阅权利和权限。英国医学杂志出版。

食管癌（ESCA）是一种与慢性炎症和免疫失调相关的恶性肿瘤。然而，该疾病的特异性免疫状态和免疫调节的关键机制还需要进一步探索。为了研究人ESCA肿瘤免疫微环境的特征及其可能的调节作用，我们通过飞行时间质谱流式分析、单细胞RNA测序、对组织进行多色荧光染色，并对初治患者的肿瘤和癌旁组织进行流式细胞术分析。我们描绘了 ESCA 的免疫景观，并揭示了 CD8（组织驻留记忆 CD8 T 细胞（CD8 TRM））与疾病密切相关我们还揭示了 ESCA 肿瘤微环境 (TME) 中 CD8 TRM 的异质性，这与其分化和功能有关。此外，肿瘤中表达高水平颗粒酶 B 和免疫的 CD8 TRM 子集（称为 tTRM）。我们证明，晚期 ESCA 的 TME 中的检查点显着减少，tTRM 是 TME 中预激活的肿瘤效应细胞，然后我们证明，源自中间单核细胞 (iMos) 的传统树突状细胞 (cDC2) 对于维持 CD8 TRM 的增殖至关重要。在 TME 中。我们的初步研究表明，缺氧可以促进iMos的凋亡并阻碍cDC2的成熟，从而降低CD8 TRM的增殖能力，从而促进癌症的进展。我们的研究揭示了CD8 TRM的重要抗肿瘤作用，并初步揭示了CD8 TRM的抗肿瘤作用。探索了人类 ESCA TME 中 iMo/cDC2/CD8 TRM 免疫轴的调节。© 作者（或其雇主）2024。在 CC BY-NC 下允许重复使用。不得商业再利用。请参阅权利和权限。英国医学杂志出版。

嵌合抗原受体自然杀伤（CAR-NK）疗法在治疗血液肿瘤方面具有广阔的前景，但由于缺乏合适的靶点以及工程化 NK 细胞的浸润性差，其在实体瘤中的疗效有限。在此，我们探讨药物处理后从内质网易位到细胞表面的免疫原性细胞死亡（ICD）标记物ERp57是否可以作为CAR-NK治疗的靶点。为了靶向ERp57，使用VHH噬菌体展示文库筛选ERp57-靶向纳米抗体（Nbs）。与人和小鼠 ERp57 具有高结合亲和力的候选 Nb 用于构建 CAR-NK 细胞。我们进行了各种体外和体内研究来评估构建的 CAR-NK 细胞的抗肿瘤功效。我们证明 ERp57 的易位不仅可以通过低剂量奥沙利铂 (OXP) 治疗诱导，而且可以在细胞上自发表达。各种类型肿瘤细胞系的表面。我们的结果表明，G6-CAR-NK92 细胞可以在体外有效杀死各种诱导或内在表达 ERp57 的肿瘤细胞系，并且在癌细胞来源的异种移植和患者来源的异种移植小鼠模型中也表现出有效的抗肿瘤作用。此外，低剂量ICD诱导药物OXP可协同增强G6-CAR-NK92细胞的抗肿瘤活性。总的来说，我们的研究结果表明ERp57可以作为CAR-NK靶向的新肿瘤抗原，并且所得结果通过与 ICD 诱导药物相结合，CAR-NK 细胞有潜力成为多种癌症的广谱免疫细胞疗法。© 作者（或其雇主）2024。CC BY 允许重复使用-NC。不得商业再利用。请参阅权利和权限。英国医学杂志出版。

OX40 作为免疫疗法的靶点已被广泛研究，激动剂抗体已进入癌症临床试验，但尚未显示出实质性疗效。在这里，我们研究了抗小鼠 (m) OX40 和抗人 (h) OX40 抗体的潜在作用机制，包括临床相关的单克隆抗体 (mAb) (GSK3174998)，并评估了同种型如何改变这些机制，旨在开发改进的抗体用于癌症的合理联合治疗。抗 mOX40 和抗 hOX40 mAb 在多种体内模型中进行了评估，包括 hOX40 敲入 (KI) 小鼠和同基因小鼠的 OT-I 过继转移免疫模型肿瘤模型。在缺乏 Fc γ 受体 (FcγR) 的 hOX40 KI 小鼠中评估了 FcγR 参与的影响。此外，还评估了使用抗小鼠程序性细胞死亡蛋白 1 (mPD-1) 的联合研究。还进行了使用外周血单核细胞 (PBMC) 的体外实验，检查可能的抗 hOX40 mAb 作用机制。临床相关 mAb GSK3174998 的同种型变体显示出机制不同的免疫调节作用； mIgG1 介导直接 T 细胞激动，而 mIgG2a 则间接发挥作用，可能是通过激活 FcγR 消耗调节性 T 细胞 (Treg)。在 OT-I 和 EG.7-OVA 模型中，hIgG1 是最有效的人类同种型，能够直接发挥作用并通过 Treg 耗竭发挥作用。抗 hOX40 hIgG1 与抗 mPD-1 协同作用，可改善 EG.7-OVA 模型的治疗结果。最后，用人外周血单核细胞 (hPBMC)、抗 hOX40 hIgG1 进行的体外测定也显示了 T 细胞刺激和 Treg 耗竭的潜力。这些发现强调了了解同种型在治疗药物作用机制中的作用的重要性单克隆抗体。作为 hIgG1，抗 hOX40 mAb 可以引发多种作用机制，有助于或阻碍治疗结果，具体取决于微环境。在设计潜在的组合伙伴及其 FcγR 要求时应考虑这一点，以实现最大利益和改善患者治疗结果。© 作者（或其雇主）2024。CC BY-NC 允许重复使用。不得商业再利用。请参阅权利和权限。英国医学杂志出版。

吉西他滨是局部晚期或转移性胰腺导管腺癌 (PDAC) 患者的一线治疗选择。然而，癌细胞经常对吉西他滨产生耐药性，这给治疗这种侵袭性疾病带来了重大挑战。在本研究中，我们重点分析了三叶因子 1 (TFF1) 在 PDAC 吉西他滨耐药中的作用。 PDAC TCGA 和细胞系数据集的分析表明 TFF1 在吉西他滨耐药的经典亚型中富集，并表明 TFF1 表达与吉西他滨治疗敏感性之间呈负相关。 PDAC 细胞中 TFF1 的基因消除增强了它们在体外和体内肿瘤异种移植物中对吉西他滨治疗的敏感性。生化研究表明，TFF1 通过增强干性、增加癌细胞的迁移能力和诱导抗凋亡基因，有助于吉西他滨耐药。我们进一步开展研究来预测可能发挥 TFF1 介​​导的吉西他滨耐药性的受体。使用 BioLuminate 软件进行的蛋白质-蛋白质对接研究表明，TFF1 与趋化因子受体 CXCR4 结合，这得到了使用 SPR 研究对 TFF1 和 CXCR4 进行实时结合分析的支持。外源添加 TFF1 通过 pAkt/pERK 轴增加了 PDAC 细胞的增殖和迁移，而用 CXCR4 特异性拮抗剂 AMD3100 治疗可以消除这种情况。总体而言，本研究证明了 TFF1-CXCR4 轴在赋予 PDAC 细胞吉西他滨耐药特性方面的贡献。版权所有 © 2024。由 Elsevier B.V. 出版。

尽管实施了个体化医疗，但由于获得性耐药机制频繁发生从而导致临床复发，转移性结直肠癌（mCRC）患者的总生存率仍然很低。因此，了解支持 mCRC 抗 EGFR 靶向治疗获得性耐药的分子机制具有临床相关性，也是改善患者预后的关键。在这里，我们观察到西妥昔单抗耐药性 CRC 细胞群之间存在明显的代谢变化，特别是 KRAS 突变的西妥昔单抗耐药性 CRC 细胞（LIM1215 和 OXCO2）中糖酵解活性增加，但 KRAS 扩增的耐药 DiFi 细胞中糖酵解活性没有增加。我们证明，西妥昔单抗耐药的 LIM1215 和 OXCO2 细胞具有回收糖酵解衍生的乳酸以维持其生长能力的能力。这与乳酸输入蛋白 MCT1 在转录物和蛋白质水平上的上调有关。 AR-C155858 对 MCT1 的药理学抑制可减少乳酸的摄取和氧化，并损害西妥昔单抗耐药 LIM1215 细胞的体外和体内生长能力。这项研究将 MCT1 依赖性乳酸利用确定为临床上可行的代谢脆弱性，以克服 CRC 中 KRAS 突变介导的抗 EGFR 治疗获得性耐药性。版权所有 © 2024。由 Elsevier B.V 出版。