抗肿瘤 M1 样和促肿瘤 M2 样肿瘤相关巨噬细胞 (TAM) 在肿瘤微环境 (TME) 中共存。这些M1/M2亚群对肿瘤的不利影响直接影响目前提高抗肿瘤免疫反应的策略。因此，通过重编程TAM来改变肿瘤免疫抑制微环境引起了人们的广泛关注。在本文中，我们构建了靶向 M2 样 TAM 的仿生纳米颗粒 (HMMDN-Met@PM)，用于巨噬细胞重新极化。具体来说，仿生纳米颗粒的核心是负载二甲双胍的中空介孔二氧化锰纳米颗粒（HMMDN-Met）。得益于HMMDN的中空多孔结构，本工作中采用的M1/M2调节剂二甲双胍可以轻松、广泛地负载到HMMDN中。此外，利用巨噬细胞膜进行 HMMDN-Met 涂层 (HMMDN-Met@MM)，以防止药物过早渗漏并提供特定的分子识别/TME 靶向。此外，在巨噬细胞膜表面修饰M2巨噬细胞靶向肽（M2pep），将药物特异性递送至M2样TAM，促进M2巨噬细胞向M1巨噬细胞极化。通过体外和体内研究，我们发现M2型巨噬细胞的表面标志物和炎症因子CD206、Arg-1和IL-10的表达量下降，而M1型巨噬细胞的表面标志物和炎症因子CD80、 TNF-α和iNOS增加，表明M2巨噬细胞成功复极化，最终实现对肿瘤生长的抑制。同时，在肿瘤的酸性和GSH条件下，HMMDN分解为Mn2+，作为磁共振成像的造影剂，从而实现对肿瘤的追踪。这项工作将仿生纳米系统应用于靶向成像和免疫治疗，为肿瘤抑制策略设计铺平了道路。© 2023。作者。

成簇规则间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 9 (Cas9) (CRISPR/Cas9) 系统是一种强大的工具，可实现精确、高效的基因操作。在相对较短的时间内，CRISPR 因其高效、简单、可编程性和低成本而成为首选的基因编辑系统。此外，近年来，CRISPR工具包一直在迅速扩展，新兴的进展在揭示人类疾病的分子机制和新的治疗策略方面显示出巨大的潜力。在这篇综述中，我们就 CRISPR 技术的最新进展及其对精准医学的影响（从目标识别、疾病建模和诊断）提供了我们的观点。我们还讨论了表观基因组、碱基编辑和 Prime 编辑等新方法对临床前癌症药物发现的影响。版权所有 © 2023 Ravichandran 和 Maddalo。

为了早期诊断和治疗 OL 患者，需要鉴定参与口腔白斑 (OL) 恶性转化的生物标志物。本研究旨在评价肿瘤坏死因子-α诱导蛋白8样2（TIPE2）表达在OL恶性转化中的功能。队列中TIPE2以及休眠细胞标志物磷酸-ERK和磷酸-p38的表达水平使用免疫组织化学方法对 103 份 OL 患者的手术标本进行了评估。体外研究了TIPE2表达对永生化人口腔角质形成细胞（IHOK）系生物学行为的影响。在40名（38.8%）OL患者中检测到TIPE2表达增加。在使用临床病理学变量和 TIPE2 表达作为辅助因子的多变量分析中，不典型增生的存在 (p=0.003) 和 TIPE2 丰度 (p=0.019) 被确定为 OL 恶性转化的独立危险因素。此外，体外分析显示，敲低TIPE2可以促进IHOK的增殖能力；然而，在 IHOK 中敲低 TIPE2 后，凋亡细胞的数量也增加。此外，在我们的队列中，TIPE2表达与休眠细胞标志物磷酸-p38表达显着相关（p=0.047）。TIPE2表达可能有助于OL的恶性转化，其功能可能与OL发病机制中的细胞休眠有关.版权所有 © 2023 国际抗癌研究所（George J. Delinasios 博士），保留所有权利。

奥希替尼目前作为EGFR突变非小细胞肺癌的一线治疗药物，耐药性的出现带来了实质性挑战。多基因组液体活检可以检查分子机制和早期耐药诊断的可能性。我们使用分子条形码文库构建试剂盒（Archer® LiquidPlex™），可以使用游离 DNA 分析多个癌症相关基因来自患者的血浆样本。我们在不同时间点连续采集了我院17名肺腺癌患者的血浆，提取游离DNA并进行LiquidPlex分析。血浆DNA浓度与奥希替尼耐药的存在与否无关。使用二代测序在耐药标本中检测到的病理突变为MAP2K1、PIK3CA、TP53、BRAF和EGFR。在复发病例中，4例（平均88天）在确诊复发前6个月内检测到初诊时发现的EGFR突变。许多在液体活检中未检测到已知 EGFR 突变的复发病例显示，检测到复发与最后一次抽血进行液体活检之间的间隔较长（平均 255 天）。频繁的液体活检有助于识别已知的 EGFR 突变，例如早期检测复发的标志物。观察到多种癌症驱动突变，表明一线奥希替尼治疗的肺腺癌存在多种耐药机制。版权所有 © 2023，国际抗癌研究所（George J. Delinasios 博士），保留所有权利。

癌症干细胞（CSC）中激活的膜转运蛋白是肝细胞癌（HCC）新型癌症疗法的目标。本研究证实了 HCC CSC 中离子通道的表达谱。通过荧光激活细胞分选，从人 HCC 细胞系 HepG2 细胞中分离出高表达乙醛脱氢酶 1 家族成员 A1 (ALDH1A1) 的细胞，并将 CSCs根据肿瘤球的形成进行鉴定。使用微阵列分析研究 CSC 中的基因表达谱。在 HepG2 细胞中，CSC 中的 ALDH1A1 信使 RNA 水平高于非 CSC。此外，CSC表现出对顺铂的抗性并具有再分化的能力。 CSCs的微阵列分析结果显示，多个与离子通道相关的基因表达上调，例如钙电压门控通道辅助亚基γ4（CACNG4）。 CACNG4 抑制剂氨氯地平在 CSC 中的细胞毒性在较低浓度下高于非 CSC，并且显着减少肿瘤球的数量。该抑制剂也显着减少了高表达 ALDH1A1 的 HepG2 细胞中的细胞数量。CACNG4 在维持 CSC 中发挥作用，其抑制剂氨氯地平可能成为 HCC 的靶向治疗药物。版权所有 © 2023 国际抗癌研究所（乔治·J·德利纳西奥斯博士），保留所有权利。

我们使用异种移植人宫颈癌的小鼠模型检查了低强度聚焦超声 (FUS) 对从血浆蛋白中解离顺铂并增强其化疗效果的影响。FUS 以脉冲模式运行，应用于浸入水中的透析盒。含有牛血清白蛋白（BSA）和顺铂的生理盐水浴，并测量扩散到盒中的顺铂的未结合水平。为了评估该技术的体内功效，在四种不同的组合条件下，在给予或不给予顺铂和 FUS 的情况下，给无胸腺 nu/nu 小鼠接种人宫颈癌细胞。腹腔注射顺铂后，FUS 在 10 天的四个独立疗程中被递送至肿瘤块 1 小时。体外平衡透析显示，与盒式磁带相比，FUS 的非热应用增加了未结合顺铂的浓度。没有暴露于超声处理，表明成功解绑。体内肿瘤生长评估表明，给予顺铂后的 FUS 导致肿瘤生长显着减少，而单独给予顺铂则表现出平台生长。在不施用顺铂的情况下，无论是否应用 FUS，都观察到相同的侵袭性肿瘤生长速率。脉冲应用 FUS 可以使顺铂与白蛋白解离，并增强其在宫颈癌中的杀肿瘤作用。需要进一步评估肿瘤内/全身顺铂浓度，以量化其对肿瘤的选择性递送。版权所有 © 2023 国际抗癌研究所（George J. Delinasios 博士），保留所有权利。

肿瘤部位的 CD103 组织驻留记忆 T 细胞 (TRM) 与良好的预后相关，并可预测免疫检查点抑制剂的有效性。活检样本中 CD103 TRM 浸润的检测可能对没有手术指征的患者有益。然而，活检组织中 TRM 检测的有用性以及活检组织和手术标本新辅助化疗后 TRM 状态的差异尚未阐明。在本研究中，我们旨在阐明能否在活检标本中检测到TRM以及化疗对TRM浸润的影响。取2017年接受新辅助化疗并接受根治性食管切除术的46例食管癌患者的组织切片。进行免疫组织化学检测使用抗 CD103 抗体进行活检和手术标本。我们检查了每位患者的 CD103 表达、临床病理特征和预后之间的关系。活检标本中检测到 TRM 浸润。活检标本中的 CD103 表达与手术标本中的表达相关。尽管CD103high和CD103low之间的临床病理结果没有统计学意义，但CD103high活检标本的患者表现出良好的预后。化疗增加了 CD103 细胞的数量：尽管没有生存获益。无论手术指征如何，我们甚至能够在活检标本中确定 TRM 状态。活检中的 CD103 评估可能比手术标本中的评估更有用和实用，可以预测预后和对免疫治疗的反应。版权所有 © 2023 国际抗癌研究所（George J. Delinasios 博士），保留所有权利。

此前，含硒化合物（Se-化合物），特别是含硒酯已显示出有前景的抗癌活性。由于分子对称性可以增强抗癌活性，因此设计了九种对称硒酯（Se-酯）作为针对阿霉素耐药乳腺癌细胞的新型、潜在活性抗癌剂。为了评估对称硒酯的生物效应，我们对其抗增殖活性进行了评估。在敏感的 MCF-7 和阿霉素耐药 KCR 乳腺癌细胞系上测定。通过棋盘组合测定对 KCR 细胞评估衍生物与阿霉素的相互作用。此外，还在 KCR 细胞上测定了 Se-酯存在下的细胞凋亡诱导和 ATP 酶活性。对称衍生物显示出显着的抗增殖活性，其中两种在 MCF-7 细胞上显示出亚微摩尔浓度的 IC50 值。此外，一些衍生物对耐药 KCR 细胞表现出选择性。大多数硒酯与阿霉素合用可产生协同作用，所有硒酯均能诱导KCR细胞早期和晚期凋亡。最后，这些化合物影响了 ABCB1 (P-gp) 的 ATP 酶活性。根据体外测试，对称的硒酯显示出有效的抗癌活性。需要进行进一步的研究以获得具有更好活性和选择性的类似衍生物，并确定这些含硒化合物在体内系统中的潜在应用。版权所有 © 2023 国际抗癌研究所（George J. Delinasios 博士） ， 版权所有。

目前的鼻咽癌治疗方法已经提高了患者的5年生存率；然而，一些患者并没有从治疗中受益。因此，必须开发现有的治疗方法或新药物来改善患者的预后。 NAD (P)H:醌氧化还原酶1 (NQO1)是一种在多种癌症中高表达的电子还原酶，可以将氮丙啶基取代的醌衍生化合物转化为烷化剂，导致细胞凋亡。因此，先前设计了一种二氮丙啶基取代的醌衍生化合物AZ-1。本研究探讨AZ-1在NPC细胞中是否具有抗癌活性并探讨其潜在机制。该研究使用NPC-TW01细胞，并使用3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑进行溴化物、集落形成、末端脱氧核苷酸转移酶 dUTP 缺口末端标记和免疫印迹测定，分别评估细胞活力、细胞存活、DNA 片段化和蛋白质表达。结果表明，AZ-1 显着抑制细胞活力和存活。 NPC-TW01 细胞。 AZ-1 还诱导裂解的 PARP、裂解的 caspase-8、裂解的 caspase-9 和裂解的 caspase-3 的表达，并引发 NPC-TW01 细胞中的 DNA 片段化。此外，AZ-1 在 NPC-TW01 细胞中诱导 DNA 损伤标记 γH2AX 表达。使用 NQO1 活性抑制剂双香豆素治疗，不仅逆转了 AZ-1 诱导的细胞活力抑制，还降低了 AZ-1 诱导的 γH2AX、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9 和 cleaved caspase-3 的表达。NQO1 逆转AZ-1 触发细胞活力抑制、DNA 损伤和细胞凋亡。这项研究的结果可能为AZ-1在鼻咽癌治疗中可能的临床应用提供依据，以改善鼻咽癌患者的预后。版权所有 © 2023 International Institute of Anticancer Research (Dr. George J. Delinasios), All保留权利。

嵌合抗原受体 (CAR) 和 T 细胞受体 (TCR) T 细胞疗法对部分实体瘤患者有效，但需要新的方法来普遍改善患者的治疗效果。在这里，我们开发了一种技术，利用 IL-15 和 IL-21（两种常见的细胞因子受体伽马链家族成员，对 T 细胞和其他淋巴细胞具有独特的多效性作用）的协同作用，来增强过继性 T-细胞的功效。我们设计了诱导膜束缚 IL-15、IL-21 或 IL-15/IL-21 组成型表达的载体。我们使用针对儿童和成人实体瘤的转基因 CAR 和 TCR 的临床相关临床前模型来确定膜束缚细胞因子对用于人类施用的工程化 T 细胞的影响。我们发现这些细胞因子通过 CAR 或 TCR T 自我传递-细胞通过重复刺激防止功能衰竭，并限制功能失调的自然杀伤 (NK) 样 T 细胞的出现。在不同的临床前鼠实体瘤模型中，我们观察到每种细胞因子的消退增强，但当 T 细胞同时包裹两种细胞因子时，抗肿瘤功效最大。膜束缚的 IL-15 和 IL-21 的共表达代表了一项技术增强工程化 T 细胞对抗实体瘤的弹性和功能，并可适用于多种治疗平台和疾病。