基于hA2AAR结构，5'-截短腺苷类似物中的疏水性C8杂芳环紧密地占据了亚口袋，将hA2AAR激动剂转化为拮抗剂，同时保持了对hA3AR的亲和力。最终的化合物，包括从d-甘露糖和d-红岛糖1,4-内酯分别合成的2,8-二取代N6-取代4'-硫代核苷或4'-酮基，通过Pd催化的定位选择性交叉偶联反应合成。所有测试化合物都完全拮抗hA2AAR，其中5d的亲和力最高（Ki,A2A = 7.7 ± 0.5 nM）。hA2AAR-5d X射线结构显示，C8杂芳环阻止了与受体激活相关的构象变化。然而，C8取代化合物仍然能够拮抗hA3AR。结构-活性关系特征和分子对接研究支持A2AAR和A3AR的不同结合模式，阐明了受体激活和选择性的药效团。有利的药代动力学研究表明，5d具有良好的口服吸收、中等半衰期和生物利用度。此外，5d显著改善了抗PD-L1的抗肿瘤效果。总体而言，本研究表明，新型的双重A2AAR/A3AR核苷类拮抗剂可能成为免疫肿瘤学领域的有希望的药物候选物。

波洛样激酶1（Plk1）被认为是一个有吸引力的抗癌疗法靶点。多年来，对于Plk1非催化波洛盒结构域（PBD）的研究提高了生成具有高度特异性的蛋白质相互作用抑制剂的期望。然而，规范的波洛盒依赖性相互作用的分子性质，需要与其磷酸锚定体通过广泛的水网络介导的相互作用，阻碍了寻找适用于Plk1 PBD药物发现的小分子的努力。本研究报告了第一个Plk1 PBD的非同址抑制剂的鉴定，名为Allopole，它是一种前药，能够破坏PBD与其同源磷酸体之间的细胞内相互作用，使Plk1从中心体和着丝粒解离，并引起有丝分裂阻滞和癌细胞杀伤。在结构水平上，它的解脱活性形式，Allopole-A，结合到一个被类似闩锁状环所遮盖的深部色氨酸-苯丙氨酸缝隙，并且需要其相邻区域来安全地保持与磷酸结合沟槽上锚定的配体。Allopole-A结合完全拆散了L2环，这一事件似乎足以触发磷酸配体的解离并在有丝分裂期间抑制PBD依赖性的Plk1功能。考虑到Allopole的高特异性和抑制增殖的功效，本研究有望为开发Plk1 PBD特异抗癌治疗药物开辟一条未开发的途径。

Xenopus胚胎覆盖着一个复杂的上皮，其中包含大量的多纤毛细胞（MCCs）。在晚期发育阶段，上皮发生了剧烈的重组，导致MCCs完全消失。细胞推出是一种推动细胞损失但同时保持上皮屏障功能的过程。正常的细胞推出通常是单向的，而双向推出常常与疾病（例如癌症）相关。我们描述了两种不同的MCC推出机制，一种是由Notch信号驱动的基底推出，另一种是由Piezo1驱动的顶部推出。在该过程的早期，基底推出具有很强的偏向性，但随着发育的进行，向顶部推出的趋势逐渐增强。重要的是，对Notch信号的反应与年龄有关，由MCC转录程序的维持所调控，从而推迟该程序对细胞损失的保护作用。相比之下，后期顶部推出受Piezo1调控，过早激活Piezo1导致早期推出，而阻断Piezo1则维持了MCC的稳定。不同的MCC损失机制揭示了它们在上皮重组过程中被去除的重要性。©2023. The Company of Biologists有限公司出版。

目前对天然杀伤细胞（NK细胞）中Toll样受体（TLR）的生物学了解有限。这主要是由于旧观念认为NK细胞无法在没有敏感前特异性清除微生物。相反，已经明确证明它们不仅可以通过与微生物分子结合来激活Toll样受体（TLR），而且这种相互作用还会引起NK细胞释放细胞因子，进而激活先天性和适应性免疫中的其他细胞。因此，基于局部输注TLR配体的免疫疗法目前被认为是治疗实体肿瘤的一种新潜在策略。在此，我们提供了一种有效刺激内质网TLR激动剂并确定内质网TLR基因表达水平的方案。该方案可用于在不同条件下对NK细胞中内质网TLR功能进行体外研究。© 2023. 作者通过排他性许可授予Springer Science+Business Media, LLC的一部分Springer Nature。

骨肉瘤（OS）是一种常见于儿童和青少年的恶性骨肿瘤。OS患者的预后较差，过去几十年来5年生存率很少有显著改善。OS的预后可能与肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的浸润有关。然而，前炎症巨噬细胞（一种TAMs亚型）在OS预后中的作用尚未报道。本研究通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）数据确定了七个亚型的TAMs，并将其定义为促血管生成TAMs（Angio-TAMs）、干扰素渲染TAMs（IFN-TAMs）、炎性细胞因子富集TAMs（Inflam-TAMs）、免疫调节TAMs（Reg-TAMs）、与脂质相关TAMs（LA-TAMs）以及类似TAMs的组织驻留巨噬细胞（RTM-TAMs）（包含两个亚细胞类型）。在对每个巨噬细胞亚型进行生存分析后，发现具有Angio-TAMs的患者在生存方面具有最显著的差异。通过差异表达分析获得与Angio-TAMs相关的八个基因，并利用LASSO算法将这些基因构建为预后模型。将临床OS病例样本根据中位风险得分分为高风险组和低风险组。与低风险组相比，高风险组的生存时间更短。还进行了关于两个风险亚组内免疫细胞浸润和免疫检查点分子表达的额外研究。在免疫治疗反应预测方面，发现Angio-TAM相关的基因风险签名与免疫检查点反应呈负相关。此外，相关富集的GO（基因本体）和KEGG（京都基因组和基因组学百科全书）通路主要与肿瘤的惡性进展有关。根据这些发现，Angio-TAM的基因风险签名可能是OS患者潜在的预后生物标志物和新的治疗靶点。请核对并确认ESM文件是否正确识别。 我们已核对并确认该文件可以正确识别。© 2023年。作者（们）独家许可Springer Science+Business Media, LLC，Springer Nature的一部分。

乳头状甲状腺癌（PTC）是最常见的内分泌恶性肿瘤。本研究旨在探究循环RNA通过海绵microRNA调节免疫相关mRNA的潜在分子机制，以及在PTC的发生和免疫调节中的作用。所有数据均从公共数据库（如GEO、Immport和TCGA）下载。使用metaMA和limma软件包鉴定差异表达（DE）mRNA（DEmRNA）、DEmiRNA和DEcircRNA。随后，筛选出免疫相关DEmRNA，并构建循环RNA-微小RNA-基因（ceRNA）调控网络。此外，进行功能注释、蛋白质相互作用（PPI）网络构建、免疫细胞浸润分析和Pearson相关性分析。最后，还进行了qRT-PCR验证和细胞实验。 共获取到2962个DEmRNA、78个DEmiRNA和51个DEcircRNA。随后，根据Immport数据库获得了195个免疫相关DEmRNA。在KEGG分析中，仅获得了细胞因子-细胞因子受体相互作用信号通路。然后，基于PPI网络和CytoHubba插件确定了8个关键的免疫相关DEmRNA。随后，从ceRNA调控网络中提取了包含关键的免疫相关DEmRNA的ceRNA子网络。在ceRNA子网络中，确定了hsa_circ_0082182-hsa-miR-18b-5p-FGF1/PDGFC、hsa_circ_0016404-hsa-miR-1275-FGF1/CTSB/IL13RA1、hsa_circ_0070100-hsa-miR-27a-3p/hsa-miR-27b-3p-TGFBR3、hsa_circ_0060055/hsa_circ_0038718-hsa-miR-150-3p-CXCL14、hsa_circ_0030427/hsa_circ_0002917-hsa-miR-22-3p-BMP7以及hsa_circ_0030427/hsa_circ_0002917-hsa-miR-125a-5p-LIFR这些轴。此外，还发现FGF1、PDGFC、CTSB、IL13RA1、TGFBR3、CXCL14、BMP7、LIFR、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-1275、hsa-miR-150-3p、hsa-miR-18b-5p和hsa-miR-27b-3p具有良好的诊断准确性，可能是PTC的潜在新诊断标志物。XCell分析显示，PTC组和对照组之间的免疫细胞浸润水平（包括Tregs、HSC、DC和单核细胞）存在显著差异。抑制hsa_circ_0082182的表达显著抑制了TPC-1细胞的活性、增殖、迁移和侵袭。 本研究揭示了几个在PTC发生、进展和生存中可能与之相关的循环RNA-微小RNA-基因轴，这为进一步理解PTC的分子机制奠定了理论基础，并为临床管理和研究做出了贡献。

γ干扰素（IFNγ）是一种重要的抗肿瘤细胞因子，对不同细胞类型具有不同的作用。IFNγ在肿瘤中的全局效应取决于它作用的细胞类型和其传播的空间范围。在不同情境下，已报道的IFNγ传播测量结果差异巨大，从最近邻信号到整个肿瘤的灌注都有。本文应用理论考量以及体外和体内实验的方法来研究黑色素瘤中的IFNγ传播。我们观察到在三维小鼠黑色素瘤细胞培养物和人类肿瘤中，有空间限制的IFNγ信号系统产生基因表达的细胞异质性，并改变受影响细胞对T细胞杀伤的易感性。只有当IFNγ产生的T细胞局部密度较高，使得这些空间限制的信号系统重叠时才会出现广泛的IFNγ信号。我们测得B16小鼠黑色素瘤培养物和人类原发性皮肤黑色素瘤中IFNγ传播的长度尺度为约30至40微米。我们的结果与IFNγ传播受简单扩散-消耗模型控制的观点一致，并为T细胞的空间组织如何对炎症信号、基因表达和免疫介导的清除产生肿瘤内异质性提供了见解。实体肿瘤通常被视为多样化的细胞“邻域”的集合：我们的工作为这种非遗传的细胞变异性提供了一个通用的解释，因为免疫介质的传播受限。

为了探索制药品和个人护理产品（PPCPs）、阻燃剂、双酚类、邻苯二甲酸酯和多环芳烃（PAHs）对人类视网膜前体细胞（RPCs）和视网膜色素上皮细胞（RPE）的毒性作用，这些细胞是视网膜发育早期的主要细胞类型，对于后续功能细胞类型分化至关重要，与视网膜疾病密切相关。在分化23天后，含有RPCs和RPE细胞的人类胚胎干细胞（hESC）基础的视网膜前器官模型暴露于10、100和1000 nM的农药（丁草胺、特布屈赉、百菌清、滴滴涕、皮丙噻灵和氯虫胺）、阻燃剂（PFOS、TBBPA、DBDPE和TDCIPP）、PPCPs（销抑菌酮和BHT）和其他典型污染物（菲、二氯环脂和双酚A）中，共持续七天。然后，监测并比较mRNA表达变化。1）所选污染物在环境和人类相关浓度下没有表现出强烈的影响，尽管阻燃剂的效果比其他化学类别更强。令人惊讶的是，一些具有不同结构的污染物显示出相似的不良效应。2）暴露于污染物中引起了不同程度的细胞脱落，可能是由于细胞外基质（ECM）和/或细胞粘附的改变。本研究建立了一个适用于评估多种污染物效应的视网膜前器官模型，并指出了阻燃剂等污染物的潜在视网膜毒性。然而，毒性机制和对细胞脱落的影响仍不清楚，值得进一步探索。此外，该模型有望用于筛选旨在缓解这些污染物有害效应的干预措施。

缺血性心血管疾病是冠心病的晚期阶段，其特征为冠状动脉阻塞或狭窄，常导致左室瘤、室间隔缺损和二尖瓣不全。身体中各种细胞分泌的细胞外囊泡（EVs）在细胞间相互作用和内在细胞调节中发挥作用。这些EVs具有脂双层膜和DNA、蛋白质、mRNA、microRNA（miRNA）和siRNA等生物组分，功用为病理生理学中的同行内分泌信号传递以及心脏稳态的维持。与具有潜在肿瘤形成性和免疫原性的干细胞移植不同，基于EV的治疗策略被提出，以满足心脏修复和再生的需求，而通过非侵入性方法检测到的循环EVs可作为珍贵的生物标志物。在本章中，我们广泛总结了源自干细胞、心肌细胞、心脏祖细胞（CPCs),内皮细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞和免疫细胞的天然EVs和生物工程EVs的心脏保护功能。此外，还讨论了EVs作为临床诊断缺血性心血管疾病的强有力分子生物标志物的潜力，因为它们与源细胞的病理机制相同。最后，我们着重强调基于EV的治疗作为缺血性心血管疾病的细胞外治疗的生物相容性选择。© 2023. 作者，独家授权给Springer Nature Singapore Pte Ltd.

靶向微管聚合和解聚是治疗实体肿瘤的一种有前途的方法。在本研究中，我们调查了一种结构新颖的微管抑制剂[4-(4-氨基苯基)-1-(4-氟苯基)-1H-吡咯-3-基](3,4,5-三甲氧基苯基)甲酮(ARDAP)对二维和三维MCF-7乳腺癌模型中抗癌作用的分子机制。低于细胞毒性浓度下，ARDAP在MCF-7细胞中表现出明显的细胞增殖、集落形成和ATP胞内含量下降，通过细胞增殖抑制机制发挥作用。此外，药物暴露导致上皮间质转变（EMT）的阻塞。在三维细胞培养中，ARDAP对肿瘤成球的生长产生负面影响，抑制成球形成并减少ATP浓度水平。值得注意的是，ARDAP暴露促进了MCF-7细胞的分化，通过诱导：(i) Oct4和Sox2干性标记物在二维和三维模型中的表达降低，以及(ii) 在二维细胞培养中下调干细胞表面标记物CD133。有趣的是，治疗后的MCF7细胞对传统化疗药物多柔比星的细胞毒性作用表现出较高的敏感性。此外，尽管ARDAP对乳腺癌细胞具有生长抑制作用，但对健康细胞MCF10A的伤害微不足道。总之，我们的结果突出了ARDAP作为新的化疗药物或化疗治疗中的辅助化合物的潜力。 © 2023 The Authors. Archiv der Pharmazie由Wiley-VCH GmbH代表Deutsche Pharmazeutische Gesellschaft出版。